本作游戏发行于2009年9月15日，《生化危机5》以延续洋房事件10年后为背景，此事件后当年的S.T.A.R.S.小队也不复存在。为了应对全球愈演愈烈的生化恐怖主义，“克里斯·雷德菲尔德（Chris Redfield）”参与创立了生化恐怖防御与评估联盟组织(bsaa)。而这次故事舞台搬到了人类发源地的非洲，克里斯前往这块炎热的地区调查生物武器黑市交易以及逮捕商人埃尔文。在行动过程中发现，这里的居民行为怪异，并且各种暴力事件频发。与此同时，一同执行任务的Alpha小队遭遇不明生物袭击导致全员团灭。克里斯协同新搭档“谢娃·阿洛玛（Sheva Alomar）”深入调查，意外发现老搭档“吉尔·瓦伦蒂安（Jill Valentine）”的情报，并查出这一切危机的主谋竟是“阿尔伯特·威斯克(Albert Wesker)”。为了阻止威斯克的“衔尾蛇（Uroboros）”计划，克里斯与谢娃联手历经多重血战，成功击败威斯克并瓦解了恐怖的生化威胁。
