一、NCBI
二、PrimerBank
三、文献＋Blast验证
引物设计原则：
1、 引物的长度一般在18-24碱基之间，扩增产物的长度一般在80-250bp之间，控制在80-150bp最佳。
2、 GC含量在40%-60%之间（太高不容易打开，效率低）
3、 引物的Tm值在55-65℃度左右，正反不能相差太大（3℃）,相差越小越好。
4、 引物的3‘端不能是A，最好选择T。碱基要随机分布，最好不要有3个连续的碱基出现。
5、 Self complementarity最好在0-3之间，Self 3‘ complementarity小于1/4碱基数，越低越好，越小越不容易形成发卡结构或其它二级结构。
6、 引物需要跨外显子。
